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常见问题及相应解决方法
1. 无特异性表达。
（1）确认染色过程次序是否正确；是否忽略某一过程；是否孵育了足够的时间；是否使用了正确的抗体，以及
二抗是否和一抗匹配。
（2）缓冲液内有叠氮钠；冲洗液或抗原修复液的PH值是否正确。
（3）底物显色系统是否失效。底物中所加H2O2量少或失效。
（4）复染或脱水剂使用不当。
2.表达较弱
如果对标本弱阳性有疑虑时，应进行对照试验。阴性对照没有染色而阳性对照弱阳性，除了考虑上述因素
外，还应考虑：
（1）不当的标本固定方式或固定时湿度过高，使部分组织抗原被破坏。
（2）不当的抗原修复方式，应参照产品说明，同时结合标本的具体情况选择合适修复方法。
（3）抗体浓度过低，或者孵育的温度/时间不够。由于标本组织来源不同，处理过程也不尽相同，所以使用者应
照抗体效价，找出最佳的使用浓度。
（4） 冲洗后切片残留多余缓冲液
如果阴性对照没有反应，阳性对照反应良好，而标本弱阳性，应考虑待检标本本身问题。
3. 染色过强
（1）抗体浓度过高或孵育时间过长；
（2）孵育时间过高；
（3）H2O2浓度过高，显色速度过快或显色时间过长。 |
